本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种低共熔溶剂提取、大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶总黄酮的方法，该方法中的提取溶剂由含水率为0％‑50％的低共熔溶剂组成，其中氯化胆碱与乙二醇、丙三醇、三乙醇胺、乙酰丙酸、丙二酸中的一种制备得到低共熔溶剂。该低共熔溶剂具有绿色无污染、蒸汽压低、无毒、可生物降解、溶解性好等独特的物理化学性质，而且对黄酮类化合物具有较好的提取效果。本发明采用超声波辅助绿色新型低共熔溶剂提取、大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶总黄酮的方法，其中，低共熔溶剂提取液可直接用于大孔吸附树脂的分离纯化。该方法具有操作简单、成本低、绿色、环保等特点，为牛蒡叶的提取和分离富集提供了新思路。